Análisis de la respuesta de células Th en un modelo murino de vacunación intranasal contra rotavirus

Los rotavirus son uno de los principales agentes etiológicos de la gastroenteritis aguda y diarrea en la población infantil menor de 5 años y en adultos mayores entodo el mundo. A pesar de que en la actualidad se han introducido a nivel mundial dos vacunas contra el rotavirus, las infecciones que este virus causa siguen provocando altas tasas de mortalidad principalmente en países con bajos ingresos económicos. El péptido sintético con secuencia 289-302 de la proteína VP6 de rotavirus (VP6₂₈₉₋₃₀₂), un epítopo específico de células Th, restringido por la molécula de MHC clase II IEd, es sumamente eficiente induciendo una respuesta protectora contra la infección por rotavirus a nivel intestinal, inoculado intranasalmente (i.n.). Objetivo. Determinar el papel de las células Th en la protección inducida por el péptido sintético de VP6₂₈₉₋₃₀₂ administrado i.n. contra la infección por rotavirus. Material y Métodos. Ratones BALB/c fueron inoculados i.n. dos veces con el péptido sintético VP6₂₈₉₋₃₀₂ en presencia de adyuvante. Se obtuvo suero pre-inmune y 21 días después de cada inoculación. La presencia de anticuerpos séricos anti-rotavirus se analizó por medio de ELISA. Veintiún días después de la segunda inoculación, los ratones fueron retados oralmente con el rotavirus murino EDIM. Durante los 8 días posteriores se colectaron las heces para determinar la carga viral y la presencia de anticuerpos IgA anti-rotavirus por medio de ELISA. Para determinar el papel de las células Th en la protección inducida, un grupo de ratones vacunados fue inoculado intraperitonealmente con un anticuerpo monoclonal (Acm) anti-CD4 de ratón, para eliminar esta población, y retado con el RV EDIM. La carga viral se comparó con la carga viral obtenida de los ratones vacunados o tratados con PBS. Para determinar si la protección por las células Th era transferible, células de bazo de ratones vacunados y recuperados de la infección fueron transferidas a ratones BALB/c naïve, 48 hrs después los ratones se infectaron con RV EDIM y se determinaron la carga viral y la presencia de anticuerpos IgA anti-rotavirus por medio de ELISA.