Estudio de la actividad microbicida de péptidos y proteínas en sobrenadantes de cultivo de linfocitos T CD8+ de neonatos y adultos humanos

El presente trabajo se centra en la evaluación de la actividad microbicida de un péptido antimicrobiano (defensina A) y una proteína (catepsina G) secretadas por los linfocitos T CD8+ vírgenes de neonatos y adultos humanos. Es bien sabido las células del sistema inmune innato producen péptidos antimicrobianos, sin embargo, se ha reportado que pueden ser producidos también por los linfocitos. En nuestro laboratorio observamos que genes asociados a péptidos antimicrobianos como defensina A, y una proteasa catepsina G, están expresados en células del sistema inmune adaptativo, y se encuentran sobreexpresados en los linfocitos T CD8+ de neonatos [7]. Trabajos preliminares por la Dra. Darely Gutiérrez y mi propio trabajo de licenciatura, mostraron que efectivamente los sobranadantes de cultivo de células T CD8+ tienen actividad antimicrobiana y que esta actividad se incrementa al activar las células. También observamos que al depletar los sobrenadantes de linfocitos T CD8+ de catepsina G y de defensina A, incrementaba el crecimiento bacteriano, aunque no se tuvieron las réplicas necesarias para demostrarlo [tesis licenciatura, Ximena Pérez Pacheco, 2019]. En el presente trabajo, comprobamos una vez mas que los sobrenadantes de linfocitos T CD8+ tienen actividad microbicida, ya que retardan el crecimiento de S. Marcescens, y esta acción se ve inhibida al depletar las proteínas de interes: Catepsina G y Defensina A. Estos resultados se observaron por medio de D.O y cuenta viable. Observamos también por citimetría de flujo que la estimulación con CD3-flagelina indujeron la expresión de Catepsina G y Defensina A, en células de adulto. Sin embargo, las células de neonato presentan estas proteínas desde nivel basal.