Estudio de la vía de activación de macrófagos murinos de la cepa BALB/c expuestos al extracto de bougainvillea xbuttiana color naranja

RESUMEN El uso de plantas empleadas tradicionalmente, se ha consolidado como una alternativa para el tratamiento de enfermedades de vías respiratorias principalmente, en países en desarrollo como México. Por lo tanto, se hace necesaria la búsqueda de estrategias de investigación que ayuden en los problemas de salud, haciendo énfasis en extractos de origen vegetal. El presente trabajo de investigación se enfocó en la aplicación de bioensayos para la observación de la actividad inmunoreguladora del extracto de B. xbuttiana. Ensayos realizados en ratones de la cepa BALB/c expuestos a el extracto de B xbuttiana ha demostrado propiedades antinociceptivas y antiinflamatorias, debido a la presencia de metabolitos secundarios como flavonoides y contenidos fenólicos. Estudios preliminares de este extracto han demostrado su actividad inmunomoduladora. Como seguimiento de esta actividad el objetivo general del presente trabajo fue determinar la vía de activación de macrófagos peritoneales de ratones de la cepa BALB/c expuestos al extracto de B. xbuttiana (variedad naranja). Para evaluar el estatus funcional de los macrófagos se diseñaron varios ensayos: porcentajes de citotoxicidad, vacuolización y la producción de peróxido de hidrógeno, así como mediadores inflamatorios. El porcentaje de citotoxicidad del extracto sobre los macrófagos peritoneales, se determinó por medio de la técnica de coloración con cristal violeta. El estado funcional de los macrófagos fue determinado por medio de la formación de vacuolas, la producción de peróxido de hidrógeno y el porcentaje de expansión celular y fagocitosis. Los niveles de citocinas secretadas por los macrófagos expuestos al extracto fueron determinados a través del ensayo biológico para la titulación de y por ELISA. Los niveles de NO fueron evaluados mediante reacciones colorimétricas del reactivo de Griess. Los resultados demostraron que el extracto de B. xbuttiana produjo: bajos porcentajes de citotoxicidad, además, fue capaz de activar macrófagos ya que incrementó la formación de vacuolas, los niveles de peróxido de hidrógeno y el porcentaje de expansión celular y la fagocitosis, al igual que los macrófagos expuestos a LPS y/o a las interleucinas 10 y 4. Además, los macrófagos expuestos al extracto presentaron bajos o nulos niveles de citocinas proinflamatorias: TNF-α, IFN-γ e IL-6, IL1-β, elevados niveles de citocinas antinflamatorias como IL-4, IL-10 y TGF-β y elevados niveles de NO. En conclusión, el extracto de B. xbuttiana fue capaz de activar a los macrófagos, ya que promueve la formación de vacuolas, induce la liberación de H2O2 e incrementa los porcentajes de expansión celular y fagocitosis. Los resultados obtenidos por el perfil de citocinas y NO que liberan estos macrófagos expuestos al extracto, sugieren que estas células fagocíticas son activadas por la vía alternativa M2c, ya que liberan elevados niveles de citocinas antiinflamatorias como: IL-10 y TGF-β, y bajos o nulos niveles de citocinas proiinflamatorias como: IL-1β, IL-6, TNF-α e IFN-γ, así, como el incremento en la secreción de NO.