Aislamiento de hongos endófitos de Phlegmariurus taxifolius productores de huperzina a

RESUMEN La enfermedad de Alzheimer (EA) es un trastorno neurodegenerativo e irreversible que afecta principalmente a personas de edad avanzada. Actualmente 50 millones de personas viven con demencia alrededor del mundo, dos tercios padecen la EA. La Huperzina A (Hup A) es un alcaloide natural que se aisló por primera vez de la planta medicinal china Huperzia serrata y ha sido ampliamente utilizado para el tratamiento de la EA. Hup A es un inhibidor reversible, potente y selectivo de la acetilcolinesterasa, tiene mayor efecto inhibitorio que los fármacos comerciales. Debido a la demanda de este alcaloide y a la sobreexplotación de las poblaciones silvestres de las especies de la familia Huperziaceae, es importante encontrar nuevas estrategias para la obtención de este alcaloide. Se colectaron plantas silvestres de Phlegmariurus taxifolius, los hongos endófitos se aislaron de hoja, tallo y raíz en cuatro medios diferentes: agar dextrosa y papa (PDA), agar harina de maíz (AHM), agar extracto de malta (AEM) y agar agua (AA). Las muestras se esterilizaron por lavado en etanol al 75% (v/v) 1 min, con NaClO 3.4% 10 min y etanol al 75% 30 seg y 4-5 lavados con agua destilada estéril. Se obtuvieron un total de 22 aislados fúngicos, en el análisis de los extractos alcaloideos fúngicos por Cromatografía Líquida de Alta Eficiencia (CLAE), 6 mostraron un pico en el tiempo de retención del estándar de Hup A. El análisis por cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas (CL-EM) confirmó la presencia de Hup A en el extracto alcaloideo de la cepa C17, la cual tuvo un rendimiento de 2.3 µg/g de micelio en peso seco. La cepa C17 fue identificada morfológicamente por las características de la colonia y por la presencia de macroconidios y microconidios. El análisis del ADN a través de la amplificación y secuenciación con los primers universales ITS1 e ITS4 (Internal Transcribed Spacer) confirmaron que la cepa C17 pertenece a una especie del género Fusarium. Es el primer reporte de Fusarium como productor de Hup A. El aislamiento de hongos endófitos productores de Hup A ofrece una alternativa para la producción de este alcaloide. Aunque el rendimiento de Hup A por parte de la cepa C17 es bajo, la optimización en los procesos de fermentación puede mejorar la producción de este alcaloide en futuros estudios.