| dc.rights.license | http://creativecommons.org/licenses/by-nc/4.0 - Atribución-NoComercial | es_MX |
| dc.contributor | FERNANDO MARTINEZ MORALES | es_MX |
| dc.contributor.author | ARIANA ADELHY ARTEAGA CASTREJON | es_MX |
| dc.contributor.other | director - Director | es_MX |
| dc.coverage.spatial | MEX - México | es_MX |
| dc.date | 2021-12-08 | |
| dc.date.accessioned | 2022-10-27T13:55:37Z | |
| dc.date.available | 2022-10-27T13:55:37Z | |
| dc.identifier.uri | http://riaa.uaem.mx/handle/20.500.12055/2741 | |
| dc.description | Las lacasas fúngicas son oxidorreductasas con baja especificidad de sustrato. La
funcionalización de la superficie de lacasa se utiliza para obtener catalizadores híbridos con
nuevas propiedades. Los residuos de aminoácidos como la lisina que están expuestos en la
superficie, pueden ser fácilmente funcionalizados a través de alquilación reductora. En este
trabajo, LAC3-K0, una enzima desprovista de lisina, se utilizó como plataforma para
detectar posibles sitios expuestos en la superficie adecuados para ser reemplazados por un
residuo de lisina relevante para futuros estudios de funcionalización. Se seleccionaron siete
sitios de un modelo 3-D LAC3-K0 a distintas distancias del sitio CuT1 en donde el sustrato
interactúa con la enzima y se obtuvieron variantes de lisina únicas (UNIKn, n = posición del
residuo) mediante mutagénesis dirigida al sitio. Las variantes, incluidas aquellas con
mutaciones adicionales (que afectan a residuos de superficie) obtenidas al azar, se
expresaron en Saccharomyces cerevisiae W303-1A y se detectaron como proteínas
secretadas funcionales, por su capacidad para oxidar guaiacol o 2,2'-azino-bis (3-
etilbenzotiazolina-6- ácido sulfónico (ABTS) en placas de agar. Todas las variantes fueron
activas a pH ácido y se mantuvieron estables a temperaturas entre 15 y 55 °C. Los ensayos
de oxidación revelaron que el reemplazo de uno o dos residuos de superficie afectó en gran
medida la actividad enzimática y la selectividad del sustrato independientemente de la
distancia al sitio CuT1. Se encontró que los parámetros catalíticos (Kmapp
y Kcatapp)
determinados con ABTS eran diferentes entre las variantes. Se determinó que el papel de
los parches hidrofóbicos detectados en la superficie de LAC3-K0 era un factor a considerar
en la interacción de los materiales híbridos.
Todas las variantes con lisina de ubicación única en superficie, creadas en este trabajo
pueden ser demandadas para obtener lacasas con cierta especificidad de sustrato en el
diseño de materiales híbridos. | es_MX |
| dc.format | pdf - Adobe PDF | es_MX |
| dc.language | spa - Español | es_MX |
| dc.publisher | El autor | es_MX |
| dc.rights | openAccess - Acceso Abierto | es_MX |
| dc.subject | 6 - CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA | es_MX |
| dc.subject.other | 31 - CIENCIAS AGRARIAS | es_MX |
| dc.title | Relevancia de residuos de lisina únicos en la superficie de lac3 diseñados para futuros procesos de funcionalización y oxidativos | es_MX |
| dc.type | doctoralThesis - Tesis de doctorado | es_MX |
| uaem.unidad | Centro de Investigación en Biotecnología (CEIB) - Centro de Investigación en Biotecnología (CEIB) | es_MX |
| uaem.programa | Doctorado en Ciencias Naturales - Doctorado en Ciencias Naturales | es_MX |
| dc.type.publication | acceptedVersion | es_MX |
| dc.audience | researchers - Investigadores | es_MX |
| dc.date.received | 2022-05-30 | |
